用旷场实验研究抑郁焦虑症模型的文献参考

尔冬

抑郁症是以显著而持久的心境障碍为主要特征的一种疾病，也称抑郁发作。临床常表现为兴趣丧失、注意困难、有自杀观念等，还包括认知功能、行为等异常表现。长期以来，高校大学生群体抑郁症的发病率呈现上升趋势，由抑郁症导致的一系列自杀、伤害他人等行为的事件也在增加，而且失恋引起抑郁症的临床病例报道也日益增多，表明失恋、社交障碍等因素也是抑郁症的重要发病原因之一。


“异性接触与隔离”(opposite sex contact and isolation，OSCI)是新近报道的一种抑郁/焦虑模型的造模方法，是模拟社交失败的压力与情感缺陷(如隔离、失恋等)等情绪障碍导致的抑郁/焦虑的动物模型。但该造模方法中，雌雄鼠能否同时造模成功以及对雌鼠是否有差别化影响尚未提及，本文旨在探索能否通过OSCI对雌雄鼠同时进行抑郁/焦虑症模型造模的方法。
1材料与方法

1.1动物  雄性SD大鼠37只，雌性SD大鼠37只，由南京青龙山动物中心提供。实验动物在适应性饲养2周后体质量为雄性(320±20)g，雌性(290±20)g。
1.2仪器 44cm×44cm×47cm大鼠旷场反应箱及数据采集和处理系统，动物行为视频跟踪分析系统。



大小鼠通用型旷场箱，XR-XZ301-R，上海欣软



小鼠旷场实验箱，XR-XZ301-M，上海欣软

1.3造模方法 大鼠置于恒温恒湿房间中，12h明亮12h黑暗，自由饮食饮水，对照组同性别的两只大鼠一笼，模型组都是1个笼子放1只雌鼠1只雄鼠，中间有隔板(隔板上有20个直径为0.5cm的洞)分为两边，前6d雌雄鼠从直接接触(雌雄鼠在隔板同一边)到间接接触(雌雄鼠分开到隔板两边)，第7天雌雄鼠完全隔离(雌雄鼠分为两个笼子即1个笼子1只)。

• 第1天:直接接触24h;
  
• 第2天:直接接触6h+间接接触18h;
  
• 第3天:直接接触1h+间接接触23h;
  
• 第4天:直接接触0.5h+间接接触23.5h;
  
• 第5天:直接接触10min+间接接触23.83h;
  
• 第6天:间接接触24h;
  
• 第7天:完全隔离;
  
• 第8天开始测试相关指标。
  

1.4行为学测试
1.4.1糖水消耗实验  OSCI模型法造模7d后的第1天即实验第8天，进行糖水消耗实验。实验开始前对大鼠进行2d适应性饮用2%浓度糖水的训练，每笼放置2个水瓶，首日两瓶均装2%浓度的蔗糖水，次日将其中1瓶改为纯水。此后，禁水24h。然后再进行糖水偏爱百分比测定，即每只大鼠同时放置定量好的1瓶2%浓度的蔗糖水和1瓶纯水。4h后，检测两瓶水的剩余量，并计算糖水偏爱百分比(糖水偏爱%=(糖水消耗量/总液体消耗量)×100%)。
1.4.2旷场实验  OSCI模型法造模7d后的第1天即实验第8天，进行旷场实验，分析大鼠的自发活动和探索能力是否因为造模产生变化。
实验开始前3d，每天在旷场箱中抚摸大鼠5min，开始实验时，将4只大鼠(2只雄鼠2只雌鼠)分别放入44cm×44cm×47cm旷场箱的4个方格内，应用动物行为视频跟踪分析系统持续记录大鼠行踪15min，记录后取出大鼠，清理旷场箱内的排泄物，用35%浓度的酒精去除其残留的气味，雌雄组各组大鼠交替测试。实验结束后，分析每只大鼠的活动总路程、垂直站立总时间、跨格数3项指标。


https://www.zhihu.com/video/1556659019200016384
1.5统计分析  用SPSS18.0软件进行数据的统计分析，结果以x±s表示，组间比较用独立样本t检验分析，其中P＜0.05表示差异有统计学意义
2结果



2.1雄鼠造模结果  与对照组雄鼠(n=10)相比，OSCI组雄鼠(n=27)的糖水偏爱百分比降低(t=2.967，P＜0.01)，旷场实验总路程减少(t=4.099，P＜0.01)、垂直站立总时间缩短(t=2.067，P＜0.05)，提示OSCI方法使雄鼠呈现抑郁/焦虑症行为学特征(图1)。
2.2雌鼠造模结果  与对照组雌鼠(n=10)相比，OSCI组雌鼠(n=27)的糖水偏爱百分比(t=4.431，P＜0.01)、旷场实验总路程均降低(t=3.574，P＜0.01)，垂直站立总时间缩短(t=2.497，P＜0.05)，提示OSCI方法也使雌鼠有抑郁/焦虑症行为学表现(图1)。


2.3雌、雄鼠造模结果的合并分析  OSCI造模后，与对照组(n=20)相比，OSCI组大鼠(n=54)的糖水偏爱百分比(t=5.066，P＜0.01)、旷场实验总路程(t=6.561，P＜0.01)、垂直站立总时间(t=2.960，P＜0.01)均降低，且跨格数也有减少(t=2.399，P＜0.05)，亦提示OSCI造模方法有效(图2)。


2.4雌、雄模型鼠的比较  模型组雌鼠(n=27)与雄鼠(n=27)的两组间对比显示，糖水偏爱百分比(t=0.333)、旷场实验总路程(t=1.138)、垂直站立总时间(t=0.116)、跨格数(t=0.612)4个相关指标均相似(P＞0.05)，提示OSCI造模方法对雌雄鼠的造模效果相似(图3)。
3讨论

本实验对同等数量的雌、雄SD大鼠进行OSCI抑郁/焦虑症模型造模，采用糖水消耗和旷场实验两项行为学测试，探索OSCI方法能否对雌雄鼠同时进行抑郁/焦虑症模型造模，检测造模后大鼠糖水偏爱百分比，旷场实验总路程、跨格数、垂直站立总时间共4项指标，结果表明，不仅雄性SD大鼠在OSCI造模7d后，与雄性对照组相比4项指标均降低，显示造模的有效性。同时，参与造模的雌性大鼠、雌雄大鼠合并分析也显示了同样的结果。此外，模型组雄鼠与模型组雌鼠组间对比，4项指标的组间差异均没有统计学意义。由此可见，OSCI造模方法可有效地对雌雄鼠同时进行抑郁/焦虑症模型的造模。
负性生活事件是抑郁症发生的重要因素，多为失恋、离婚等事件。失恋性精神抑郁症患者，一般是指存在亲密关系的异性之间的矛盾而导致亲密关系破裂，产生心理问题并对中枢神经系统产生强烈的刺激，使其发生功能紊乱而引起的一系列症候群。


在一些案例中，求助者处于失恋状态，把不满的情绪投射到他人身上，导致一些生理、心理反应。OSCI造模方法模拟了一种消极的奖赏剥夺(与异性接触的过程)，而奖赏即是一种可引起愉悦情绪的情感体验，如社会交流对群居动物而言是一种奖赏行为。有报道可通过引导雄性大鼠在与同性的社交障碍下产生抑郁/焦虑的造模方法，而OSCI造模方法证明了不仅是同性，人们在与异性交流中产生社会交流障碍时也可引起抑郁/焦虑。OSCI造模方法可能使雄、雌大鼠抑郁/焦虑的结果，提示异性情感接触出现障碍时，双方均可受到情感问题的影响。因此，在人类异性情感出现问题时，双方可能都需要得到关心和引导，调节自身心态，尽量避免产生抑郁。
<hr/>文章来源： 皖南医学院沈天爱、吴霄汉等老师发表的《异性接触与隔离抑郁 /焦虑症模型的雌雄大鼠同步造模法》，文章编号1002－0217( 2019) 01－0009－04。
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