小鼠常用的注射给药方法

夏末汀芷

在生物医学研究中，为了观察药物疗效、阐明疾病发生机制，研究动物机体功能及代谢等，通常都需要将药物注入动物体内。
实验动物常见的给药方式有：注射给药，灌胃给药，口服，鼻滴给药等多种。一般需要根据实验目的、动物种类及药物剂型、剂量等，选择合适的给药方式。
今天，小编重点向大家介绍注射给药，目前主要的注射给药方式有皮下注射、皮内注射、肌肉注射、（尾）静脉注射和腹腔注射几种，下面详细介绍：
01 皮下注射（Subcutaneous Injections，SC）

皮下注射给药：是将药液注入皮下结缔组织，经毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环的方法。在生物医学研究中，皮下注射也是一种常见的给药方式。
该技术通常用于皮肤较薄、皮下组织疏松且血管较少的部位，如颈背部、腋下或大腿内侧的皮肤。(建议常用部位是鼠两耳提起后可出现一皮肤凹陷处，在此给药可确保药物给在皮下。)
凡是易溶解、无刺激性的药物以及菌苗、疫苗、细胞等，都可以进行皮下注射。
具体操作步骤：首先抓取固定小鼠，剃去注射部位毛发并用酒精消毒，用左手拇指与食指捏起小鼠背部皮肤，右手手持注射器，针头斜面朝上与皮肤呈30-45°角刺入帐篷状皮肤，刺入后针头轻轻左右摆动（易摆动说明已刺入皮下），再轻轻抽吸，如无回血，可缓慢地将药物注入皮下（推药过程中能明显观察到注射部位鼓起一小包，小包一定时间可消失）。注射完拔出针头后用无菌棉签压住进针部位片刻以免药物外漏。
注射剂量：大鼠一般小于1ml/100g，小鼠一般为0.1～0.3ml/10g。总药量：小鼠不超过0.5ml，大鼠不超过1ml。
注意事项：
1.正确抓取动物，动物必须受到足够宽松的抓握，这样皮肤才能活动起来。2.如果动物要接受多次皮下注射，可交替注射部位。


02 皮内注射（Intradermal Injections，ID ）

皮内注射给药：是将药液注入皮肤的表皮和真皮之间，用于观察皮肤血管的通透性变化或皮内反应，接种、过敏实验等。皮内注射吸收较慢。皮内注射一般选用背部脊柱两侧的皮肤。
具体操作步骤：固定小鼠后，将注射部位毛发剃去，局部常规消毒，左手拇指和食指按住皮肤使之绷紧，在两指之间进行针头穿刺，针头斜面朝上与皮肤呈大约30°角刺入，同时针头稍微上挑起并稍刺入，将药液注入皮内。注射后皮肤出现小丘疹状隆起并且比周围的皮肤白，且皮肤上的毛孔极为明显。如果注射时感觉比较费力，说明注射正确；如果感觉比较容易，说明已注入皮下，要拔出针头重新注射。
注射剂量：大鼠一般小于0.1ml/次，小鼠一般小于0.05ml/次。
注意事项：不要回抽注射器。


03 肌肉注射（intramuscular injection，IM）

肌肉注射一般用于有特定给药方式要求的药物，或不溶、难溶于水而混悬于油或其他溶剂中的药物时可选择肌肉注射。注射部位一般选择肌肉丰富、血管较少的臀部。大小鼠后肢处肌肉较少，故一般不进行肌肉注射。
具体操作步骤：肌肉注射一般在动物麻醉后进行，或者由两个人操作，一人固定动物，另一人执行注射。一般注射部位为大腿内侧或外侧肌肉。酒精消毒注射部位后，左手抓住后肢，右手持针插入肌肉，试着回抽针筒，如有血液或液体回流，表示不适当，需重新插入。确定针头插入肌肉后，慢慢将药剂推入，推入的速度应避免太快，以免组织损伤。
注射剂量：大鼠单次注射量一般不要超过0.3ml。小鼠单次注射量一般不要超过0.1ml。
注意事项：1、正确抓取动物，确保动物的一个后腿是自由的，稳定地注射。2、针应该垂直于动物的皮肤插入。3、不要注射到后面的肌肉群，因为可能会损伤坐骨神经。4、如果小鼠要接受多次肌肉注射，要双腿交替注射。


皮下注射和肌肉注射，药物主要是经皮下和肌肉中的毛细血管吸收，吸收没有静脉注射完全，但皮下注射和肌肉注射也成功的避开了胃肠道和肝脏首过代谢。
04  尾静脉注射（Intravenous Injections，IV）

静脉注射：一种用注射器将少量或单一种类药品注射到静脉，使药物直接进入血液循环的一种方式。静脉注射是效率最高的给药方式，不需要溶剂的吸收，不存在收过代谢，生物利用率最高。可以通过一次性注射或滴注的方式注射入血管内。
大小鼠的尾静脉共有3条，其中尾部左右两侧各有一条，背侧有一条。因为左右两侧静脉角质层较薄且易固定，所以常为注射所用。
具体操作步骤：操作时将小鼠用专门的保定器保定，使其尾部充分暴露，尾部用45-50℃的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩张，并使表皮角质软化，用左手拇指、食指和无名指捏住并从下面托起尾巴，用无名指和小指夹住尾巴的末梢，右手持注射器使针头与静脉平行（小于30°），距鼠尾尖1/4处（约距尾尖2-3厘米）处进针，此处皮薄易于刺入，先缓注少量药液，如无阻力，无白色皮丘出现，表示针头已进入静脉，可正式注入药物。
若推药无阻力且血管整条会立即由红变白，推完药则血管又恢复红色，用干棉球按压止血则尾静脉注射完成。如需反复注射，应从尾部末端开始，逐渐向尾根方向移动。


注射剂量：小鼠单次注射量一般为0.1~0.2ml/10g。大鼠单次注射量一般为0.3~0.5ml/100g。
注意事项：
（1）如阻力较大，或注射时有隆起，则说明注射到了皮下。此时应迅速抽出注射器，轻轻在原注射位点稍上的位置再次注射。
（2）静脉血管充盈是保证注射成功率的重要因素。一般使用酒精在小鼠尾静脉部位来回擦拭，由于小鼠尾静脉很浅静脉很浅，插入深度不宜超过斜面太多。
（3）注射开始尽可能靠近尾尖（远心端），如果第一次注射失败，这样还有未受损静脉用来再次注射。


05 腹腔注射（Intraperitoneal Injections，IP）

腹腔注射：将药物注入动物胃肠道浆膜以外、腹膜以内的注射方式。腹腔注射作为常用给药方式的一种，方便易行，吸收快速，一般用于小鼠麻醉、药物诱导等实验，一般用于不适宜或经胃肠道吸收效率较低的给药，并且还能对幼鼠进行诱导。
经腹腔给药，药物吸收速度较静脉注射慢，但是这种给药方式可以注射的药物体积要大于静脉注射，对于个体较小的实验动物给药具有重要意义。
具体操作步骤：腹腔注射时右手持注射器，左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴，另外三个手指抓住小鼠的颈部，翻转小鼠使小鼠的头部向下，腹部向上。这样由于重力作用，腹腔中的器官就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。
右手将注射针头于左下腹部刺入皮下，以45度角穿过腹肌（进针不能太深，感到明显的穿透感即可，以防刺入脏器，进针后注意回抽，抽回较吃力且仅空气被回吸则说明进针成功），固定针头，缓缓注入药液。进针的动作要轻柔，防止刺伤腹部器官。
注射完后不能立马抽出针头，要将针头在腹腔内多停留一段时间，堵住伤口阻止药物外流，让药物随着脏器蠕动被转移。
注射剂量：大鼠单次注射量一般为1.0~2.0ml/100g。小鼠单次注射量一般为0.1~0.2ml/10g。
注意事项：
1、针头刺破腹肌后会有落空感，此时针头已进入腹腔，应停止进针以免针头刺入过深损伤内脏。
2、为避免伤及内脏，应使动物处于头低位，使内脏移向上腹。
3、对于体重较小的小鼠，腹腔注射时针头可以在腹部皮下穿行一小段距离，最好是从腹部一侧进针，穿过腹中线后在腹部的另一侧进入腹腔，注射完药物后，缓缓拔出针头，并轻微旋转针头，防止漏液。
小鼠尾静脉注射对初学者来说，可能有一定难度，但注射是否成功容易判断，不会对实验结果造成影响。而腹腔注射虽然看似简单，但如果操作不当，很容易造成注射失败，并不被发现，直接影响到实验结果。


结语
注射给药法就介绍到这里了，其他给药方法下次推出。
参考来源

• https://www.jove.com/cn/t/2771/manual-restraint-common-compound-administration-routes-mice
  
• Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats
  
• Administration of Substances to Laboratory Animals Routes of Administration and Factors to Consider
  

来源：“中洪博元生物”公众号，文章版权归原作者所有。
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周鸣

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胡新民

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