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小鼠脑立体定位注射方法

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发表于 2022-11-28 15:32:45 | 显示全部楼层 |阅读模式
小鼠脑立体定位注射方法
1. 首先,了解小鼠脑部结构的大概位置,在这里,我们主要讲述侧脑室和海马区域的位置,应用比较广泛。
大小鼠脑的解剖图谱在文章的最后的链接处(引用了知乎上的文章)。




侧脑室的位置,如图显示的是比较容易注射的位置
Interaural 耳间 3.58 mm—3.22 mm
Bregma 前卤 -0.22 mm-- -0.58 mm
最佳的位置为
X= 1.00 mm
Z= 1.5 mm


Lateral 横向距离,0.60 mm-2.16 mm,最佳位置为0.80 mm
Y= 0.80 mm。
最终决定皮层区域的最佳位置
X=1.00 mm, Y= 0.80 mm, Z= 1.5 mm
海马区域





Interaural 2.58 mm—1.50 mm
Bregma -1.22 mm-- -2.30 mm
前卤 (Bregma)
海马区域最佳位置,X=1.5 mm, Y= 2.0 mm, Z=2.0 mm。


实验步骤
1. 利用某些颅骨外面的标志(如前囟、后囟、外耳道、眼眶、矢状缝等)或其它参考点所规定的三维坐标系统,来确定皮层下某些神经核团结构的位置.
注意:操作为大鼠上门齿卡入横杆,调节旋钮压紧鼻杆;将耳杆插入大鼠耳道,平衡调节左、右耳杆,使大鼠两耳间连线与耳杆在同一直线上,保证左、右耳杆的刻度位置相同后调节旋钮锁紧耳杆。大鼠固定完好的判断标准:鼻对正中,头部不动,提尾不掉,目测大脑放置水平(使颅骨水平)。
2. 前囟点即Bregma点,位于冠状缝和矢状缝的交接处,以其作为颅骨三维坐标系统原点O。
3. Bregma点定位过程大体分为: 选定脑部靠中间的位置。剪除大鼠顶被毛后,用碘酒或酒精消毒,纵向切开头皮,用止血钳将皮肤左右分开,用刀片刮去颅盖骨膜,或用双氧水腐蚀头盖骨膜,彻底去除骨膜后让Bregma点显现出来。用脑定位仪读取Bregma点数值作为三维坐标原点O。
4. 侧脑室位置的定位,以眼间连线的中点为起点,垂直于眼间连线后移3-4 mm,然后侧移1.1 mm左右,向下3 mm左右,即进入侧脑室。
具体的位置依据小鼠的脑大小确定,坐标值,即ML值(X轴)、AP值(Y轴)、DV值(Z轴)。侧脑室位置为前囟点旁开1.5 mm,向后囟方向1.1 mm,深2.0 mm(坐标即为±1.5,-1.1,-4.5)。调节X轴(1.5个单位)及Y轴(1.1个单位)旋钮移动操作臂到坐标位置。
海马区域的位置,X= 1.5 mm, Y = 2 mm, Z= 1.5 mm。
5. 10ul的微量注射器,注射剂量是2ul(两侧注射,各1 ul),打药时间2 min左右,打药之后再停留2 min,然后慢慢的拔出注射器针头。


注意事项:
1、实验鼠术前需要禁食,否则易引起大鼠腹胀气。
2、注射0.2mL1%戊巴比妥钠麻醉小鼠
3、如果使用钻头钻孔时,注意途中用棉签沾PBS涂抹进行降温,不要伤及硬脑膜。
4、注射完成后,一般需要留针2-5min(让药液充分吸收)后方可退出针头。
5. 注射器用PBS冲洗微量注射器(5μl规格)3-5次。
鼠脑立体定位位置图
大鼠脑立体定位图谱-中文版:
http://anatomy.fmmu.edu.cn/atlas1.pdf
大鼠脑立体定位图谱-英文版:
http://anatomy.fmmu.edu.cn/atlas2.PDF
小鼠脑立体定位图谱-英文版:
http://anatomy.fmmu.edu.cn/atlas3.pdf
发育期小鼠脑立体定位图谱-英文版:
http://anatomy.fmmu.edu.cn/atl
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发表于 2022-11-28 15:33:45 | 显示全部楼层
内容全被删了
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发表于 2022-11-28 15:33:50 | 显示全部楼层
什哦意思,没有删呀
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发表于 2022-11-28 15:34:15 | 显示全部楼层
四医大战友。就是打不开啊
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发表于 2022-11-28 15:35:14 | 显示全部楼层
我也是研究神经科学的
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发表于 2022-11-28 15:36:07 | 显示全部楼层
可以打开
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发表于 2022-11-28 15:36:44 | 显示全部楼层
你为什么打不开呢
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发表于 2022-11-28 15:37:13 | 显示全部楼层
你好,我想问一下最后那个最佳位置是怎么得出来的呀,还有这个定位和小鼠的体重和周龄,品系有联系不~还有文中的侧脑室是大鼠还是小鼠的呀,谢谢~~
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发表于 2022-11-28 15:37:44 | 显示全部楼层
图谱我打开确实也是显示已删除呢~~
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发表于 2022-11-28 15:38:02 | 显示全部楼层
后面有链接,你自己可以下载看
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